二價鐵、三價鐵及總鐵離子的測定 |
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二價鐵、三價鐵及總鐵離子的測定 （鄰菲羅啉分光光度法） 1、 原理 亞鐵離子在pH值3-9的條件下，與鄰菲羅琳反應，生成桔紅色絡合離子，此絡合離子在pH值3-4.5時最為穩(wěn)定。水中三價鐵離子用鹽酸羥胺還原成亞鐵離子，即可測定總鐵。 2、 試劑 2.1、HAc-NaAc緩沖溶液（pH≈5.0）（提取液）：稱取136g醋酸鈉，加水使之溶解，在其中加入120 mL冰醋酸，加水稀釋至500mL。 2.2 、HCl溶液（1+1）。 2.3、鹽酸羥胺溶液（10%）：新鮮配制。 2.4、鄰二氮菲溶液（0.15%）：新鮮配制 2.5、鐵標準溶液的配制 鐵標準儲備液:準確稱取0.7020g硫酸亞鐵銨(NH4)2Fe(SO4)2.6H2O],溶于1+1硫酸50mL中,轉移至1000mL容量瓶中,加水至標線,搖勻.此溶液每毫升含鐵0.1mg. 吸取上述鐵標準溶液10mL，移入100mL容量瓶中用水稀釋至刻度，此溶液為1mL含0.01mg鐵標準溶液。 3、 儀器 3.1、分光光度計 4、 分析步驟 4.1標準曲線的繪制 分別取0.01mg/ml鐵標準溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL于6只3mL比色管中，加水至約1mL分別依次加入0.2mL 10%鹽酸羥胺溶液，稍搖動；加入0.20mL 0.15%鄰二氮菲溶液及0.2mL HAc-NaAc緩沖溶液，加水稀釋至刻度，充分搖勻。放置10min后于510nm處，用比色皿，以試劑空白作參比，測其吸光度，以吸光度為縱坐標，鐵離子毫克數為橫坐標，繪制標準曲線。 4.2提取液的測定 取提取液1mL于3mL離心管中，用鹽酸調節(jié)使水呈酸性，pH＜3，剛果紅試紙顯藍色。加熱煮沸10分鐘，冷卻后加10%鹽酸羥胺溶液0.2mL（測二價鐵時換成蒸餾水），搖勻，1分鐘后再加0.15%鄰菲羅琳溶液0.2mL，及0.2mL HAc-NaAc緩沖溶液后用水稀釋至刻度。10分鐘后于510nm處，以試劑空白作參比，測其吸光度。 5、 分析結果的計算 提取液中總鐵離子含量X（mg/L），按下式計算： X=A/V×1000 式中：A----從標準曲線查得的鐵離子的含量，毫克； V----提取液體積，毫升。 6、注釋 測二價鐵時提取液不加10%鹽酸羥胺溶液，測三價鐵時以總鐵減去二價鐵 7、允許差 提取液總鐵離子含量小于1mg/L時，平行測定兩結果差不大于0.03mg/L。 8、結果表示 取平行測定兩結果算術平均值，作為提取液的總鐵離子含量。 從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫(yī)學實驗外包及論文潤色服務，協(xié)助客戶各類實驗服務及論文潤色，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴! 如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
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